作為一個(gè)非盈利機(jī)構(gòu)，Addgene一直以提供共享資源和專業(yè)高效的材料轉(zhuǎn)移方案來(lái)幫助科學(xué)研究技術(shù)進(jìn)步，并減少操作復(fù)雜度為目標(biāo)。

近期，Addgene宣布與Promega達(dá)成戰(zhàn)略合作，為全球客戶提供這些獨(dú)一無(wú)二的由Promega科研人員開發(fā)的旨在精簡(jiǎn)分子和細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)流程的質(zhì)粒庫(kù)。這個(gè)質(zhì)粒庫(kù)中包含用于敏感基因表達(dá)分析的螢光素酶報(bào)告載體和用于使用NanoLuc、HaloTag、SmBiT和LgBiT等標(biāo)簽檢測(cè)和跟蹤蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)融合載體。

Promega的質(zhì)粒有這兩種形式：

? 以預(yù)轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中的穿刺菌形式；

? 置于Tris緩沖液中的20 μg純化DNA形式；

在僅研究目的情況下，所有的質(zhì)粒都可向?qū)W術(shù)，非盈利和工業(yè)研究者提供，并且不需要用戶提供MTA（材料轉(zhuǎn)移協(xié)議）。

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? 生物熒光試驗(yàn)

? 蛋白質(zhì)相互作用研究

? 定向蛋白質(zhì)退化

NanoLuc是一種19.1 kDa、異常明亮和穩(wěn)定的螢光素酶，能夠在內(nèi)源性表達(dá)水平上進(jìn)行高度靈敏的檢測(cè)。NanoLuc融合可用于細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外應(yīng)用，適用于在您希望對(duì)內(nèi)源性蛋白質(zhì)表達(dá)和相互作用的干擾最小的實(shí)驗(yàn)，例如在不干擾感興趣的病毒的情況下探索病毒生物學(xué)，以及在高度可擴(kuò)展的檢測(cè)中監(jiān)測(cè)內(nèi)源性蛋白質(zhì)動(dòng)力學(xué)。

HaloTag技術(shù)通過(guò)可互換的配體將融合蛋白的功能和特性控制在你手中。HaloTags與這些合成化學(xué)配體形成共價(jià)鍵，這些配體是為純化、可視化和功能研究等特殊功能而開發(fā)的。你甚至可以為你的特定目的定制配體。HaloTag技術(shù)針對(duì)各種蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行了優(yōu)化，包括大腸桿菌、哺乳動(dòng)物細(xì)胞和無(wú)細(xì)胞系統(tǒng)。

HiBiT是一種小型多功能表位標(biāo)簽，可實(shí)現(xiàn)精確的蛋白質(zhì)檢測(cè)。它可以與LgBiT配對(duì)用于生物發(fā)光檢測(cè)，也可以與高親和力抗HiBiT抗體配對(duì)用于其他檢測(cè)選項(xiàng)。HiBiT技術(shù)的卓越動(dòng)態(tài)范圍可以檢測(cè)裂解物或活細(xì)胞中內(nèi)源性水平的低豐度蛋白質(zhì)，從而保持生理相關(guān)性。

NanoLuc Binary Technology（NanoBiT）是一種結(jié)構(gòu)互補(bǔ)報(bào)告系統(tǒng)，由大BiT（LgBiT；18 kDa）亞基和小互補(bǔ)肽小BiT（SmBiT；11個(gè)氨基酸）組成。該系統(tǒng)非常適合蛋白質(zhì)相互作用（PPI）研究，其中每種感興趣的蛋白質(zhì)都與LgBiT或SmBiT融合并在活細(xì)胞中表達(dá)。當(dāng)這兩種蛋白質(zhì)相互作用時(shí)，亞基聚集在一起形成活性酶，并在底物存在的情況下產(chǎn)生明亮的發(fā)光信號(hào)。NanoBiT PPI檢測(cè)能夠?qū)Φ鞍踪|(zhì)相互作用、結(jié)合和解離進(jìn)行動(dòng)力學(xué)、實(shí)時(shí)分析。