HuH-7細胞由日本Okayama大學Nakabayshi,H. & Sato,J.等人于1982年從一名57歲日本男性的高分化肝細胞癌腫瘤組織中分離建立。是研究肝病發(fā)病機制、HCV病毒復(fù)制機制及開發(fā)開病毒藥物的理想模型。
細胞基本信息：
HuH-7, JTC-39
上皮樣，貼壁生長
是（其中兩個位點的鑒定結(jié)果）
病毒污染檢測：
通過實時熒光定量PCR檢測病毒基因組片段，結(jié)果顯示16種常見病毒均為陰性。
培養(yǎng)基：
90% DMEM + 10%FBS（該細胞系可在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)，細胞在生長過程中會向培養(yǎng)基中釋放包括含甲胎蛋白在內(nèi)的血清蛋白。）
細胞培養(yǎng)注意事項：
HuH-7 細胞所用 DMEM 培養(yǎng)基要求
用于 HuH-7 細胞培養(yǎng)的 DMEM（杜爾貝科改良伊格爾培養(yǎng)基）為低葡萄糖 DMEM 培養(yǎng)基。標準 DMEM 培養(yǎng)基即低葡萄糖配方，高葡萄糖 DMEM 是其改良版本。
切勿使用高葡萄糖 DMEM 培養(yǎng)基。已有多項報道指出，在 HuH-7 細胞培養(yǎng)中使用高葡萄糖 DMEM 會引發(fā)諸多問題。
標準 DMEM 培養(yǎng)基含有 L - 谷氨酰胺、丙酮酸鈉和低濃度葡萄糖（1克/升）。培養(yǎng)基中不應(yīng)添加 HEPES（4-羥乙基哌嗪乙磺酸）。
培養(yǎng)初始階段的培養(yǎng)瓶（培養(yǎng)皿）規(guī)格
HuH-7 細胞解凍后能否立即存活，取決于細胞密度。請將一個凍存管中的所有細胞接種到1 個 T-25 培養(yǎng)瓶或1 個 6 厘米培養(yǎng)皿中。
接種前需通過短暫離心去除二甲基亞砜（DMSO）。
復(fù)蘇培養(yǎng)和傳代時，若細胞稀釋度過高，可能導(dǎo)致細胞死亡或生長遲緩。
傳代操作
對細胞進行胰酶消化時，需使用足量的胰酶溶液，之后通過短暫離心收集細胞。
若胰酶溶液用量不足，可能導(dǎo)致細胞干燥，進而對細胞造成損傷。
蛋白分泌：
據(jù)文獻報道，該細胞在培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的血清蛋白有：白蛋白、前白蛋白、α1-抗胰蛋白酶、銅藍蛋白、纖維蛋白原、纖連蛋白、結(jié)合珠蛋白、血紅素結(jié)合蛋白、β-脂蛋白、α2-巨球蛋白、β2-微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、脂蛋白、α2-巨球蛋白、β2-微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補體成分C3和C4以及甲胎蛋白。在完全明確成分的合成培養(yǎng)基中生長的這些肝癌細胞系，可能為體外研究人肝癌細胞的生長與代謝提供新的途徑。
支持HCV復(fù)制：
是首個被證實支持丙型肝炎病毒（HCV） 全長復(fù)制的細胞系，是HCV研究的重要細胞模型。
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參考文獻
Growth of human hepatoma cells lines with differentiated functions in chemically defined medium.Nakabayashi H,Taketa K,Miyano K,Yamane T,Sato J Cancer Res. 1982 Sep;42(9):3858-63
